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2011-6
ELISA技術(shù)中的抗原抗體反應(yīng)抗體的結(jié)構(gòu)抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測(cè)定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個(gè)輕鏈(L)和兩個(gè)重...
2011-6
ELISA技術(shù)與自動(dòng)化在一般的概念里,ELISA技術(shù)的可操作性強(qiáng),不需復(fù)雜設(shè)備,甚至*手工加樣、洗板和肉眼判讀結(jié)果,便可完成該技術(shù)的操作。隨著人們對(duì)質(zhì)量控制意識(shí)的加強(qiáng),盡可能做到zui低限度的減少系統(tǒng)誤差,以及減少勞動(dòng)強(qiáng)度等觀念的不斷改進(jìn),...
2011-6
ELISA操作要點(diǎn)1.標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些...
2011-6
蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印法檢定蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)經(jīng)SDS-PAGE后,膠片浸入轉(zhuǎn)印緩沖液,蛋白質(zhì)可被轉(zhuǎn)印到硝化纖維紙(nitrocellulose)上,先經(jīng)?素洗去SDS,并使蛋白質(zhì)回?原態(tài)抗原性,可使用抗體進(jìn)?免疫染色(Towbinetal,1979)。儀器...
2011-6
蛋白質(zhì)提取與純化技術(shù)選擇材料及預(yù)處理以蛋白質(zhì)和結(jié)構(gòu)與功能為基礎(chǔ),從分子水平上認(rèn)識(shí)生命現(xiàn)象,已經(jīng)成為現(xiàn)代生物學(xué)發(fā)展的主要方向,研究蛋白質(zhì),首先要得到高度純化并具有生物活性的目的物質(zhì)。蛋白質(zhì)的制備工作涉及物理、化學(xué)和生物等各方面知識(shí),但基本原理...
2011-6
酶聯(lián)免疫技術(shù)的特點(diǎn)酶聯(lián)免疫技術(shù)是利用酶催化底物反應(yīng)的生物放大作用,提高特異性抗原-抗體免疫學(xué)反應(yīng)檢測(cè)敏感性的一種標(biāo)記免疫技術(shù)。該技術(shù)所用的酶要求純度高、催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高、專一性強(qiáng)、性質(zhì)穩(wěn)定、來(lái)源豐富、價(jià)格不貴、制備成的酶標(biāo)抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)...
2011-6
1.雙抗體夾心法測(cè)抗原雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原zui常用的方法,操作步驟如下:1)將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。2)加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他...
2011-6
免疫熒光技術(shù)操作步驟一.直接免疫熒光法測(cè)抗原基本原理將熒光素標(biāo)記在相應(yīng)的抗體上,直接與相應(yīng)抗原反應(yīng)。其優(yōu)點(diǎn)是方法簡(jiǎn)便、特異性高,非特異性熒光染色少,相對(duì)使用標(biāo)記抗體用量偏大。試劑與儀器磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,pH7.4...